Nissl traipu šķīdums

Nissl krāsošanas šķīdums, ko parasti izmanto neirobioloģijā, tiek izmantots Nissl ķermeņa krāsošanai nervu šūnās. Nissilie ķermeņi, kas galvenokārt sastāv no ribosomām un raupja endoplazmatiskā tīkla, ir bazofīli. Nissl korpusu var izmantot kā jutīgu nervu šūnu bojājumu marķieri histomorfoloģijā. Tāpēc Nissl krāsošanu var izmantot, lai parādītu smadzeņu vai muguras smadzeņu nervu pamatstruktūru un atspoguļotu nervu šūnu patoloģisko morfoloģiju. Ronei ķermeņu skaits un normāla morfoloģija liecina, ka nervu šūnu darbība ir normāla. Ronei ķermeņu skaita samazināšanās un patoloģiska morfoloģija liecina, ka nervu šūnas var tikt bojātas.

Šī produkta galvenā sastāvdaļa ir toluidīna zilais, koncentrācija ir 0,5%, var izmantot Nissl krāsošanai, darbība ir vienkārša un ātra. Pēc krāsošanas bija redzamas tumši zilas Nissilium granulas, un kodoli bija gaiši zili. Fons būtībā bija bezkrāsains.

Uzglabāt un transportēt istabas temperatūrā, derīga 18 mēnešus.

1. Paraugu apstrāde

Parafīna sekcijām sekcijas tika atvaskots ar ksilolu 5-10 min. un pēc tam atkal atvaskots, pievienojot svaigu ksilolu 5-10 min. Pēc tam 5 minūtes sagriež absolūtā etanolā, 5 minūtes svaigā absolūtā etanolā, pēc tam 5 minūtes apstrādā ar 75% etanolu un 2 minūtes mazgā ar ūdeni.

Saldētām sekcijām: izņemiet sadaļu no -20 grādiem C un atgriezieties istabas temperatūrā. Ja nepieciešama fiksācija, fiksējiet ar 4% paraformaldehīdu (Ieteicams lietot G1101) istabas temperatūrā vismaz 10 minūtes un 2 minūtes mazgā ar ūdeni.

Kultivētām šūnām šūnas tika fiksētas ar 4% paraformaldehīdu (ieteicams G1101) vismaz 10 minūtes un mazgātas ar ūdeni 2 minūtes.

2. Nissl krāsošana: iepriekš minētie apstrādātie paraugi ir jākrāso ar Nissl krāsošanas šķīdumu 2-5 minūtes (laiku var pielāgot atbilstoši jūsu krāsošanas prasībām). Mazgājiet, līdz priekšmetstikliņiem nav krāsas tekošā ūdenī.

3. (pēc izvēles) Atšķiriet sekcijas ar 0.1% ledus etiķskābi. Jāīsteno atbilstoša audu diferenciācija vai nediferencēšana atbilstoši audu krāsai. Smadzeņu audi, kas atšķiras no Nissile ķermeņiem, ir tumši zili ar gaiši zilu vai bezkrāsainu fonu.

4. Nosusiniet lieko ūdeni uz šķēlītēm un ievietojiet šķēles cepeškrāsnī 65 grādos uz 4h vai vairāk, lai nožūtu.

5. Pietiekami izcep un iegremdē ksilolā uz 10 minūtēm caurspīdīgā vai atstājiet priekšmetstikliņus atdzist ksilolā un noblīvējiet ar neitrālu gumiju.

Piezīme. Sagatavojiet ksilolu, gradienta etanolu, 0,1% ledus etiķskābi, neitrālu sveķus utt.

1. Darbības laikā valkājiet laboratorijas mēteli un vienreizējās lietošanas cimdus.

2. Krāsošanas šķīdums ir atkārtoti lietojams. 100 ml krāsošanas šķīduma var izmantot, lai iekrāsotu (iegremdētu vai nomestu) aptuveni 350 sekcijas. Nomainiet krāsošanas šķīdumu ar jaunu, ja audu vai šūnu krāsa ir ievērojami gaišāka vai neparasta.

Tikai pētniecībai!

Populāri tagi: nissl traipu šķīdums, Ķīna nissl traipu risinājumu ražotāji, piegādātāji, rūpnīca