▇ EksperimentālsProcedūra
1. Iegremdējiet slīpēšanas sekciju masā šķīdumā uz nakti (aptuveni 15 stundas).
2. Ievietojiet sekciju masā šķīdumā un siltumu 37 grādu cepeškrāsnī 30 minūtes. Vienlaicīgi uzkarsē masu D un masu F risinājumus vienā un tajā pašā krāsnī.
3. Izskalojiet ar krāna ūdeni 30 sekundes, līdz dzeltenā nokrāsa audos vairs nav pamanāma.
4. Tieši pirms lietošanas sajauciet masu B un Masson C risinājumus vienādos apjomos. Salīdziniet sadaļu maisījumā 3 minūtes, pēc tam īsi izskalojiet ar tekošu ūdeni.
5. Diferencēt 1% hidrohloriskā spirta apmēram 1 minūtē, līdz kodols parādās pelēcīgi melns un fons ir gandrīz bezkrāsains vai gaiši pelēks.
6. Īsumā noskalojiet ar krāna ūdeni, noņemiet lieko ūdeni un 6 minūtes trieciet ar masveida šķīdumu, līdz audi parādās spilgti sarkani. Ja sarkanā krāsa ir pārāk viegla, attiecīgi pagariniet krāsošanas laiku.
7. Noņemiet lieko ūdeni, neļaujot sekcijai pilnībā nožūt, pēc tam apmēram 2 minūtes apstrādājiet ar masveida E šķīdumu.
8. Bez skalošanas, nedaudz iztukšojiet lieko masu E šķīdumu un 5 minūtes tieši iegremdējiet tieši Masson F šķīdumā.
9. Diferencēt, mazgājot trīs cilindrus ar 1% ledāja etiķskābi apmēram 5 s uz cilindru. Dehidrāts trīs absolūtā etanola cilindros: 5 s pirmajā, 10 sekundes otrajā un trešajā. Notīrē divos N-butanola cilindros (30 s pirmajā, 2 minūtēs otrajā), kam seko divi ksilola cilindri (katrs 10 s). Visbeidzot, uzstādiet ar neitrāliem sveķiem
▇ Rezultātu interpretācija
Kolagēna šķiedras šķiet zilas. Muskuļu šķiedras, fibrīns un sarkanās asins šūnas šķiet sarkanas.
▇ Piesardzības pasākumi
- Pēc krāsošanas ar masu šķīdumu noskalojiet pietiekami ātri, lai notīrītu sekciju.
- Nomainiet jauktu krāsošanas šķīdumu, pamatojoties uz sekciju skaitu, vai pēc vajadzības sagatavojiet svaigu šķīdumu.
- Rūpīgi kontrolējiet masveida šķīduma kolagēna krāsošanas intensitāti nevajadzētu parādīties sarkanā vai pārāk intensīvā, jo tas var ietekmēt turpmāko krāsošanu ar masas F šķīdumu.
- Diferenciācijas laikā ar ledāju etiķskābi pārmērīga diferenciācija rada gaiši zilu kolagēna traipu, savukārt nepietiekama diferenciācija var izraisīt pārklāšanos ar sarkanu, radot purpursarkanu krāsu.
▇ Padomi
Kādiem paraugiem ir nepieciešami cieto audu slīpēšanas sekcijas?
Paraugiem, kas satur metālu, keramiku, plastmasu, šķiedras, osteogēnus materiālus vai asinsvadu audus ar metāla stendu, kā arī nedeksificētu kaulu un zobiem ir nepieciešami cieto audu slīpēšanas sekcijas. Pēc implantācijas šos materiālus nevar noņemt un atkaļķot, ņemot vērā nepieciešamību pēc integrējošas analīzes. Turklāt noņemšana var izraisīt audu sadrumstalotību. Tāpēc precīzai histoloģiskai novērtēšanai ir būtiska implanta iegulšana sadaļā un krāsošana ir būtiska.
