Hoechst 33258 krāsošanas šķīdums (gatavs lietošanai)

Hoechst 33258 molekulārā formula ir C25H24N6O·3HCl, molekulmasa ir 533,88 un CAS numurs ir 23491-45-4. Hoechst 33258 ir zila fluorescējoša krāsviela, kas var iekļūt šūnu membrānā, un tās fluorescence ievērojami uzlabojas, ja to apvieno ar divpavedienu DNS. Maksimālais ierosmes viļņa garums ir 346 nm, bet maksimālais emisijas viļņa garums ir 460 nm. Hoechst 33258 parasti izmanto apoptozes noteikšanai, kodolkrāsošanai vai ikdienas DNS krāsošanai. To var izmantot fiksētu šūnu un audu vai nefiksētu šūnu un audu kodolu iekrāsošanai. Pēc krāsošanas to var novērot ar fluorescences mikroskopu vai noteikt ar plūsmas citometriju. Novērojot ar fluorescences mikroskopu, to ierosina ultravioletā gaisma, kas ir zilā fluorescence.

Šis produkts ir lietošanai gatavs šķīdums, kura koncentrācija ir optimizēta, lai atbilstu visu veidu ikdienas krāsošanas vajadzībām.

Slapjā ledus transportēšana; Uzglabāt 2-8 grādu temperatūrā prom no gaismas, derīgs 6 mēnešus.

1. Fiksētām šūnu vai audu sekcijām:

a. Fiksētajiem šūnu vai audu paraugiem pēc fiksācijas noņemiet fiksējošo šķīdumu un mazgājiet ar PBS vai citu atbilstošu buferšķīdumu 2-3 reizes, 3-5 min katru reizi (lai noteiktu suspendētās šūnas, lūdzu, ievērojiet rutīnu visos eksperimentos pievieno suspendēto šūnu darbības metodi, centrifugēšanu un citus posmus);

b. (Neobligāts solis) Ja fiksētās šūnas vai audi ir jāapstrādā ar imūnfluorescences krāsošanu, vispirms jāveic attiecīgā apstrāde un pēc tam pēc apstrādes jāveic Hoechst 33258 krāsošana;

c. Tieši paņemiet atbilstošu daudzumu produkta Hoechst 33258 krāsvielu šķīduma (gatavs lietošanai), lai pārklātu paraugu, un inkubējiet istabas temperatūrā apmēram 5 minūtes tumsā;

d. Noņemiet krāsvielu šķīdumu un mazgājiet to ar PBS vai citu atbilstošu buferšķīdumu 2-3 reizes, 3-5 min katru reizi;

e. Pēc plākšņu aizzīmogošanas vai tieši ievietošanas fluorescences mikroskopā ierosmes viļņa garums bija 350 nm, bet emisijas viļņa garums bija 460 nm.

2. Dzīvām šūnām vai kultivētiem audiem:

a. Pievienojiet atbilstošu daudzumu Hoechst 33258 krāsvielu šķīduma (lietošanai gatavā tipa) šūnu kultūrai, lai pilnībā pārklātu krāsojamo paraugu; parasti 6-iedobes plāksnes iedobei jāpievieno 1 ml krāsošanas šķīduma, bet 96-iedobes plāksnes iedobei jāpievieno 100 μL krāsošanas šķīduma. Paraugi tika inkubēti 10-20 min inkubatorā 37 grādu temperatūrā.

b. Noņemiet krāsvielu šķīdumu un mazgājiet to ar PBS vai citu atbilstošu buferšķīdumu 2-3 reizes, 3-5 min katru reizi;

c. Tieši novērojot fluorescences mikroskopā, ierosmes viļņa garums bija 350 nm, un emisijas viļņa garums bija 460 nm.

Piezīme:

1. Visām fluorescējošām krāsvielām ir fluorescences slāpēšanas problēma. Fotografēt ieteicams pēc iespējas ātrāk pēc krāsošanas. Lai palēninātu fluorescences dzēšanu, var izmantot pretfluorescences slāpēšanas līdzekli (ieteicams G1401).

2. Darbības laikā valkājiet laboratorijas mēteli un vienreizējās lietošanas cimdus.

Tikai pētniecībai!

Populāri tagi: hoechst 33258 krāsošanas šķīdums (gatavs lietošanai), Ķīna hoechst 33258 krāsošanas šķīdums (gatavs lietošanai) ražotāji, piegādātāji, rūpnīca